甲苯二异氰酸盐对人支气管上皮细胞通透性的影响
莫冠文1
蔡绍曦1
赵海金1
李文军2
佟万成1
刘来昱1
1.南方医科大学南方医院呼吸科,广东,广州,5105152.南方医科大学公共卫生与热带医学学院,广东,广州,510515
摘要：目的 探讨甲苯二异氰酸盐(TDI)对正常人支气管上皮细胞(16HBE)活性氧(ROS)生成及通透性的影响.方法 应用改良的Son氏等方法制备TDI-人血清白蛋白(TDI-HSA).四唑盐(MTT)比色法检测不同浓度的TDI-HSA对正常人支气管上皮细胞株16HBE活力的影响.实验分4组:以未加任何处理因素的16HBE为对照组,20、60、100μg/ml的TDI-HSA处理16HBE 24 h,通过2',7'-二氢二氯荧光黄双乙酸钠(DCFH-DA)细胞内ROS荧光染色,收集细胞后以流式细胞仪检测荧光强度.选择对ROS水平影响较大的100 μg/ml的TDI-HSA处理16HBE 24 h.流式细胞仪定量检测抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)对TDI-HSA诱导ROS生成的影响,荧光显微镜观察照相.采用跨上皮电阻(TEER)法检测上皮单层细胞的通透性.结果 120μg/ml以下浓度的TDI-HSA对细胞活力无显著影响.ROS水平在对照组、20、60和100μg/ml组分别为:65.04±4.56,91.76±4.84,119.96±10.40,203.11±8.21.100μg/ml TDI-HSA组与对照组及20、60 μg/ml组相比,16HBE的ROS水平显著升高(P＜0.05).对照组、100 μg/ml TDI-HSA处理组、50 mmol/LNAC预处理组的细胞内ROS水平分别为:69.02±2.14,246.47±18.55,102.50±4.60;而TEER分别为:280.75±11.93,92.25±11.44,207.25±7.41.NAC可显著降低TDI-HSA诱导的ROS生成(P＜0.05),改善氧化应激对单层细胞通透性的影响(P＜0.05).结论 TDI显著增加HBEROS的产生,其诱导的氧化应激部分参与支气管上皮细胞通透性的增加.这可能是TDI诱发哮喘的发病机制之一.
关键词：甲苯二异氰酸盐哮喘活性氧氧化应激血清白蛋白N-乙酰半胱氨酸人支气管上皮细胞细胞通透性
分类号：R562.2(呼吸系及胸部疾病)
资助基金：国家自然科学基金(30270593)中华医学会慢性呼吸道疾病专项(07010130021,08020460124)广东省科技计划(2005207007)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 239-243 )
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