表达纯化糖原合成酶激酶3β的两种方法比较
许少飞1
徐杰2
黎明涛1
1.中山大学中山医学院蛋白质组学研究中心,广东,广州,5100802.中山大学中山医学院人体解剖学教研室,广东,广州,510080
摘要：目的 建立一套高纯度、高活性表达糖原合成酶激酶3β的技术.方法 分别采用大肠杆菌和杆状病毒昆虫细胞蛋白表达系统表达糖原合成酶激酶3β,通过His和GST标签两步纯化目的 蛋白,SDS-PAGE观察目的 蛋白的纯度,激酶反应观察目的 蛋白的活性.结果 大肠杆菌表达纯化的糖原合成酶激酶3β占纯化后总蛋白的壁为54%,昆虫细胞表达纯化的糖原合成酶激酶3p占纯化后总蛋白的量为96%;昆虫细胞来源的目的 蛋白比大肠杆菌来源的目的 蛋白活性高-倍左右.结论 相比大肠杆菌表达的糖原合成酶激酶3β,昆虫细胞表达的目的 蛋白具有更高的纯度和活性.
关键词：糖原合成酶激酶3β大肠杆菌表达系统杆状病毒昆虫细胞表达系统
分类号：R349.84(基础医学)
资助基金：国家自然科学基金(81030024)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 397-402 )
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