鸭乙型肝炎病毒YMDD突变株体外耐药模型建立
付喜花1
梁蔚芳1
吴小东2
沈国俊1
何海棠1
陈金军1
侯金林1
1.南方医科大学南方医院感染内科,广东广州,5105152.衡阳市中心医院消化内科,湖南衡阳,421001
摘要：目的 构建鸭乙型肝炎病毒(DHBV)YMDD点突变的复制质粒,研究其在鸡肝癌细胞中的复制及拉米夫定抗性.方法 以广东樱桃谷鸭DHBV分离株为模板,将3631 bp的片段克隆至载体pBluescript Ⅱ KS(+)中,构建含1.2倍病毒全基因的重组质粒,经PCR定点突变获得YMDD突变株.将构建质粒经FuGENETM 6瞬时转染鸡肝癌细胞,分析变异株的复制能力及拉米夫定耐药性.结果 PCR鉴定、酶切鉴定及序列测定均证实成功获得1.2倍DHBV全基因YMDD突变质粒.Southern印迹杂交表明重组质粒转染细胞后可检测到病毒复制中间体;野生株的复制能力是突变株的2.7倍.拉米夫定对变异株的IC50=37.12+8.81 ng/ml,高于野生株的IC50=10.90±4.80 ng/ml.结论 与野生株相比,YMDD突变株质粒体外复制活性减弱,对拉米夫定敏感性下降.
关键词：鸭乙型肝炎病毒定点突变鸡肝癌细胞系拉米夫定
分类号：R512(传染病)
资助基金：国家重点基础研究发展计划（973计划）(2007CBS12901)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 633-636 )
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