风湿性心脏病自身抗原RHDAG1的获得与鉴定
孟锦绣1
李运雄2
朱平3
李玲4
卢聪3
郑少忆3
李广华5
余细勇2
1.广东省人民医院/广东省医学科学院医学研究中心,广东,广州510080广东省心血管病研究所心外科,广东,广州,5100802.广东省人民医院/广东省医学科学院医学研究中心,广东,广州5100803.广东省心血管病研究所心外科,广东,广州,5100804.广东省人民医院/广东省医学科学院风湿科,广东,广州5100805.广东省人民医院/广东省医学科学院检验科,广东,广州510080
摘要：目的 探索用风湿性心脏病患者噬菌体表达文库构建和免疫筛选方法来研究风湿性心脏病的自身抗原候选分子.方法 提取风湿性瓣膜性心脏病患者心肌组织总RNA,分离纯化mRNA并逆转录合成长链cDNA,用噬菌体载体构建表达文库,用风湿热患者血清免疫筛选该库,对筛选获得的自身抗原基因进行鉴定、生物信息学分析、体外表达、Western blotting鉴定和免疫反应结合性分析.结果 成功构建了风湿性心脏病患者心脏组织噬菌体表达文库,原始文库滴度为3.3×106pfu/ml,重组率为99%,81%外源片段大于1 kb.通过免疫筛选方法获得了自身抗原RHDAG1,该自身抗原与人类角蛋白18同源,能与活动性风湿热患者血清和风湿性心脏病患者血清结合,而与体检健康人血清无结合.结论 构建噬菌体展示文库方法可以有效地用于筛选和获得风湿性心脏病患者自身抗原;本研究提示自身抗原RHDAG1可成为风湿热和威风心病的候选分子标志物.
关键词：风湿性心脏病自身抗原RHDAG1分子标志物
分类号：R541.2(心脏、血管（循环系）疾病)
资助基金：国家自然科学基金(30700327)广东省自然科学基金(7300047)广东省科技计划(2008658)广东省医学科学基金(A2010046)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1154-1158 )
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