用于活体成像的人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞系的构建
王珂1
谢四梅1
何建军1
任予1
夏海滨2
张新伟1
1.西安交通大学第一附属医院肿瘤外科,陕西西安,7100612.陕西师范大学基因治疗实验室,陕西西安,710062
摘要：目的 构建能稳定表达荧光素酶和绿色荧光蛋白的人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞系以建立可用于活体成像的三阴性乳腺癌裸鼠移植瘤模型.方法 采用磷酸钙共沉淀的方法构建表达荧光素酶和绿色荧光蛋白的慢病毒载体,体外感染MDA-MB-231细胞,经G418筛选得到稳定细胞系后,通过活体成像评价感染后细胞表达荧光素酶的情况,并通过MTT法、transwell肿瘤侵袭模型、细胞划痕实验等评价细胞的增殖、侵袭及转移能力是否改变；此外将细胞接种至雌性BALB/c-nu//nu裸小鼠的右侧第2对乳房垫内,构建乳腺癌原位肿瘤模型.利用活体成像系统监测体内肿瘤的生长及转移情况,并通过冰冻切片、HE染色评价细胞系在活体内的稳定性及成瘤能力.结果 成功构建能稳定表达荧光素酶和绿色荧光蛋白的MDA-MB-231细胞系,荧光素酶的活性达到每细胞9689 photons/s,慢病毒的整合没有改变细胞的增殖、迁移及侵袭能力；成功建立了乳腺癌裸鼠原位移植瘤模型.结论 (1)慢病毒以其高效稳定的感染率,应作为标记荧光素酶基因的首选载体；(2)带有荧光素酶的MDA-MB-231细胞在动物体内可被快速而灵敏的检测到,这将为人三阴性乳腺癌转移机制的研究及抗肿瘤药物的研发提供一个直观、方便及灵敏的平台；(3)荧光素酶和荧光蛋白基因双标记优于单标记.
关键词：活体生物发光成像MDA-MB-231细胞三阴性乳腺癌裸鼠移植瘤模型
分类号：R737.9(泌尿生殖器肿瘤)
资助基金：陕西省科学技术研究发展计划(2009K12-01)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 1812-1818 )
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