肠道病毒71型VP1～VP4基因克隆及其表达产物的免疫原性
宋远斌1
余楠2
何思杰2
陈欣欣1
王斌1
车小燕2
曾其毅1
1.南方医科大学珠江医院儿科中心,广东广州,5102822.南方医科大学医学检验中心,广东广州,510282
摘要：目的 克隆并表达肠道病毒71型VP1～VP4蛋白基因,初步鉴定其免疫原性.方法 抽提病毒RNA,经RT-PCR方法分别扩增出VP1～VP4蛋白基因片段,经克隆后,在QIA表达系统中表达,表达产物用8 mol/L尿素洗涤及Ni柱亲和层析纯化后,用肠道病毒71型免疫兔血清和柯萨奇病毒A16型免疫兔血清对重组蛋白进行Western blotting及ELISA鉴定.结果 构建的重组质粒pQE30a/VP1～VP4经IPTG诱导,重组蛋白VP1～VP4高效表达并纯化成功,经Western blotting及ELISA证实重组蛋白VP1～VP4可以被免疫兔血清特异识别.结论 肠道病毒71型VP1～VP4蛋白表达载体在大肠杆菌M15中高效表达.纯化产物具有较强的免疫原性,为今后EV71亚单位疫苗的研究和检测试剂盒提供了参考.
关键词：肠道病毒71型基因克隆原核表达免疫原性
分类号：R373.2(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
资助基金：国家科技重大专项(2009ZX10004-306)广州市医药卫生科技重大项目(201102A211007)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1846-1850 )
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