MicroRNA-221通过抑制CDKN1C/p57表达促进结肠癌细胞增殖
孙凯
王伟
雷尚通
吴承堂
李国新
1.南方医科大学南方医院普通外科,广东广州,5105152.南方医科大学南方医院普通外科,广东广州,5105153.南方医科大学南方医院普通外科,广东广州,5105154.南方医科大学南方医院普通外科,广东广州,5105155.南方医科大学南方医院普通外科,广东广州,510515
摘要：目的 探讨microRNA-221 (MIR221)对结肠癌细胞中CDKN1C/p57表达调控及细胞增殖的影响.方法 常规培养人结肠癌Caco2细胞系,预先给予或不给予CDKN1C/p57干扰性小RNA (anti-p57-siRNA)处理,再以脂质体分别转染MIR221前体(pre-MIR221)或MIR221特异性抑制剂(anti-MIR221)寡核苷酸,应用实时荧光定量PCR(Real-time RT-PCR)检测Caeo2细胞中MIR221表达状况,运用半定量RT-PCR及Western-blot分析CDKN1C/p57 mRNA及蛋白表达状况,并通过噻唑蓝(MTT)比色法观察细胞的增殖状态；构建pGL3-p57荧光素酶报告载体并与pre-MIR221或anti-MIR221共转染Caco2细胞,检测转染细胞中荧光素酶活性变化.结果 Caco2细胞转染pre-MIR221后,CDKN1C/p57蛋白表达水平下降,细胞增殖显著(P＜0.01)；而anti-MIR221可上调CDKN1C/p57蛋白表达继而抑制细胞增殖,且此种抑制作用可被anti-p57-siRNA逆转,说明此种抑制效应确由CDKN1C/p57所介导；在转染重组有CDKN1C/p57基因3′-UTR片段的荧光素酶报告载体的Caco2细胞中,共转染pre-MIR221后荧光素酶活性下降,而共转染anti-MIR221后荧光素酶活性增高,差异均具有统计学意义(P＜0.01).结论 MIR221可通过与CDKN 1C/p57 mRNA3′-UTR区域结合使结肠癌细胞中CDKN1C/p57蛋白表达下降而促进肿瘤增殖；anti-MIR221则可通过上调CDKN1 C/p57蛋白表达继而抑制细胞增殖而发挥抗瘤效应.
关键词：结肠癌mieroRNA-221CDKN1 C/p57增殖
分类号：R574.62(消化系及腹部疾病)
资助基金：广东省自然科学基金(8451051501000390)广东省医学科研基金(B2010190)南方医科大学南方医院院长基金(2008C005)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1885-1889 )
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