CXCR4特异性拮抗剂SDF-1P2G54的构建及活性评价
杨飞华1
龙北国1
谭毅2
龚雅1
马伟峰1
1.南方医科大学公共卫生与热带医学学院微生物学系,广东广州,5105152.温州医学院中美糖尿病并发症研究所,浙江温州,325035
摘要：目的 对SDF-1进行遗传改造,将其第2位氨基酸由脯氨酸(P)突变为甘氨酸(G),且缺失其C-端α螺旋结构,以获得一种CXCR4特异性拮抗剂SDF- 1P2G54.方法 将PCR扩增的SDF-1突变体SDF-1p2g54的基因插入表达载体pET-30a(+),并转化BL21(DE3)菌株.IPTG诱导表达的重组蛋白SDF-1P2G54在变性条件下采用镍柱亲和层析纯化,并通过梯度稀释和超滤方法得以复性.利用趋化实验鉴定SDF-1P2G54对Jurkat细胞的趋化活性及对SDF-1趋化活性的抑制效应,流式细胞仪检测SDF-1P2G54诱导MOLT4细胞钙内流及细胞表面CXCR4内在化的能力.结果 SDF-1P2G54完全丧失激活CXCR4、趋化Jurkat细胞跨膜迁移和诱导MOLT4细胞钙内流的能力,却保持了与CXCR4的高亲和性,能有效抑制野生型SDF-1对Jurkat的趋化效应、诱导MOLT4细胞表面CXCR4的快速内在化.结论 SDF-1P2G54是一种新型的CXCR4特异性拮抗剂,具有开发成抑制HIV-1感染和癌细胞转移等重大疾病特效药物的潜在应用价值.
关键词：基质细胞衍生因子-1CXCR4拮抗剂SDF-1P2G54
分类号：R34(基础医学)
资助基金：国家自然科学基金(81101732)教育部高等学校博士学科点专项科研基金(20104433120013)广东省医学科学技术研究项目(B2009139)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 55-60 )
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