HNF6重组慢病毒载体的构建及对大肠癌SW620细胞侵袭转移能力的影响
耿海涛
肖乾
徐邓勇
胡立锋
丁克峰
1.浙江大学肿瘤研究所/浙江大学医学院附属第二医院肿瘤外科,浙江杭州,3100092.浙江大学肿瘤研究所/浙江大学医学院附属第二医院肿瘤外科,浙江杭州,3100093.浙江大学肿瘤研究所/浙江大学医学院附属第二医院肿瘤外科,浙江杭州,3100094.浙江大学肿瘤研究所/浙江大学医学院附属第二医院肿瘤外科,浙江杭州,3100095.浙江大学肿瘤研究所/浙江大学医学院附属第二医院肿瘤外科,浙江杭州,310009
摘要：目的 构建HNF6的慢病毒载体pLeno-DCE-HA-HNF6,建立稳定表达HNF6的大肠癌细胞系并观察HNF6对大肠癌细胞系SW620的侵袭转移能力的影响.方法 构建HNF6慢病毒载体pLeno-DCE-HA-HNF6,感染293T细胞,收集上清测定病毒滴度；病毒颗粒转染SW620细胞,通过荧光显微镜及流式细胞仪观察转染效率；定量PCR(qPCR)及Western blotting检测HNF6的表达；应用Transwell和划痕试验观察SW620细胞侵袭转移能力的变化.结果 通过PCR及酶切鉴定成功构建pLeno-DCE-HA-HNF6载体；包装并得到高滴度的病毒颗粒；转染SW620后,qPCR及Western blotting检测到HNF6表达明显升高；HNF6导致SW620明显的细胞形态变化,Transwell及划痕试验证明HNF6使SW620细胞迁移能力降低.结论 成功构建并包装得到HNF6的慢病毒颗粒,建立稳定表达HNF6的大肠癌细胞系SW620-HNF6,证明过表达HNF6后可以抑制大肠癌侵袭转移能力.
关键词：肝细胞核因子6SW620慢病毒大肠癌转移
分类号：R735.3(消化系肿瘤)R73-37(肿瘤学实验研究)
资助基金：国家自然科学基金(81071801)浙江省杰出青年科学基金(R2100071)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 66-70 )
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