慢病毒介导LOX-1基因RNA干扰抑制氧化应激诱导心肌细胞凋亡
刘彬1
黄佳城1
周迎春1
孙学刚2
曾文璧1
李杏1
臧书文1
郝文文1
1.南方医科大学南方医院中医科,广东广州,5105152.南方医科大学中医药学院分子生物学实验室,广东广州,510515
摘要:目的 构建大鼠凝集素养氧化低密度脂蛋白受体( LOX-1) RNA干扰慢病毒表达载体并观察LOX-1在氧化应激诱导心肌细胞凋亡中的作用.方法 设计针对大鼠LOX-1的shRNA序列,将shRNA序列插入到pLentiLox3.7(pLL3.7)慢病毒载体中,构建慢病毒载体pLL3.7-LOX1.慢病毒载体及包装载体dR8.9、VSVG共转染293FT细胞包装慢病毒.慢病毒侵染H9C2大鼠心肌细胞,RT-PCR鉴定对LOX-1抑制效率,CCK-8、Hochest33258染色检测LOX-1对H2O2诱导H9C2心肌细胞凋亡的影响.结果 通过双酶切鉴定,证实shRNA正确插入慢病毒载体,DNA测序证实插入的序列正确,抑制LOX-1能抑制H2O2诱导的细胞活力下降,减轻H2O2诱导的心肌细胞凋亡,与H2O2组比较均有统计学意义(P<0.01).结论 成功构建靶向大鼠LOX-1基因RNAi慢病毒载体,LOX-1激活可能在H2O2诱导心肌细胞凋亡中发挥重要作用.
关键词:慢病毒RNA干扰LOX-1氧化应激凋亡
分类号:R543.5(心脏、血管(循环系)疾病)
资助基金:国家自然科学基金(30973850,81173459)广东省科技计划(2010B060500009)
论文发表日期:2012-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 165-168,172 )
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