hsa-miR-654-5p通过抑制骨形态发生蛋白2调控人骨髓基质干细胞成骨分化
魏均强1
陈华2
郑晓飞3
张伯勋2
王岩2
唐佩福2
余飞2
宋青4
黎檀实4
1.解放军总医院 骨科专科医院,北京100853;军事医学科学院辐射医学研究所,北京1008502.解放军总医院 骨科专科医院,北京,1008533.解放军总医院 急救部,北京,1008534.军事医学科学院辐射医学研究所,北京,100850
摘要：目的 明确萎缩性骨不连组织水平表达上调的hsa-miR-654-5p在人骨髓基质干细胞(hBMSCs)中对其预测靶基因骨形态发生蛋白2(BMP2)mRNA和蛋白的抑制作用,探索其在成骨分化过程中的生物学调控功能.方法 分离培养hBMSCs,将第4代hBMSCs培养16 h后分别按相应体系转染细胞,再培养48 h后取六孔板内细胞提取总RNA和总蛋白,进行实时定量PCR(qRT-PCR)和Western blotting,取24孔板内细胞进行双荧光素酶报告基因检测.结果 当hBMSCs中hsa-miR-654-5p过表达时,BMP2的mRNA和蛋白表达水平均发生明显下调；双荧光素酶报告基因检测提示,BMP2的预测靶位点直接受hsa-miR-654-5p的抑制调控,该靶位点被突变后hsa-miR-654-5p对BMP2的抑制作用消失.结论 hsa-miR-654-5p可通过作用于BMP2的特定靶位点而直接抑制BMP2的mRNA和蛋白表达.hsa-miR-654-5p的变化在成骨分化调控过程中具有重要作用.
关键词：微小核糖核酸骨形态发生蛋白2成骨分化实时定量PCR蛋白印迹荧光素酶报告基因
分类号：R33(人体生理学)R34(基础医学)
资助基金：国家自然科学基金(81000803)北京市自然科学基金(7083114)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 291-295 )
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