雷帕霉素对高糖诱导的肾系膜细胞自噬抑制、氧化损伤和衰老的影响
李锦
白雪源
崔少远
傅博
陈香美
1.中国人民解放军总医院肾病科/肾脏疾病国家重点实验室,北京,1008532.中国人民解放军总医院肾病科/肾脏疾病国家重点实验室,北京,1008533.中国人民解放军总医院肾病科/肾脏疾病国家重点实验室,北京,1008534.中国人民解放军总医院肾病科/肾脏疾病国家重点实验室,北京,1008535.中国人民解放军总医院肾病科/肾脏疾病国家重点实验室,北京,100853
摘要：目的 探讨雷帕霉素及3-甲基腺嘌呤(3-MA)对高糖诱导的原代大鼠系膜细胞自噬、氧化损伤及衰老的影响.方法 从大鼠肾分离培养原代肾小球系膜细胞(GMCs),分为正常对照组、高糖组、高糖+雷帕霉素(自噬增强剂)及高糖+3-甲基腺嘌呤(自噬抑制剂)干预组.在细胞培养24h、72h及10d时,Western blotting观测自噬标志物-自噬相关基因LC3及泛素结合蛋白p62/SQSTM1的表达变化;硫代巴比妥酸法检测细胞脂质损伤产物-丙二醛(MDA)水平,2,4-二硝基苯肼(DNPH)比色法测定细胞蛋白质损伤产物-羰基含量,通过进行衰老相关β-半乳糖苷酶活性( SA-β-gal)染色及衰老相关异染色质斑块(SAHF)分析检测细胞的衰老程度.结果 与对照组相比,细胞经高糖处理72h和10d后,自噬标志物LC3表达降低,p62/SQSTMI升高,MDA及羰基含量上升(均P＜0.05)；处理72h细胞SA-β-gal染色阳性率增加(P＜0.05),细胞核异染色质斑块形成增加.高糖培养的细胞用雷帕霉素干预72h和10d后,LC3表达升高,p62/SQSTMI表达下降,MDA及蛋白质羰基含量均下降(均P＜0.05),72h后细胞SA-β-gal染色阳性率下降(P＜0.05),细胞核异染色质斑块形成减少；高糖培养的细胞用3-MA干预72 h和l0d后,LC3表达下降,p62/SQSTMI表达升高,MDA及蛋白质羰基含量升高(均P＜0.05).72h细胞SA-β-gal染色阳性率上升(P＜0.05),细胞核斑块形成增多.结论 高糖可抑制系膜细胞自噬功能,促进系膜细胞氧化损伤,加速细胞衰老；雷帕霉素干预可减轻高糖对系膜细胞自噬功能抑制,减少氧化损伤,延缓衰老；3-MA加重高糖对系膜细胞自噬功能的抑制,进一步加重细胞氧化损伤,加速衰老.
关键词：系膜细胞高糖雷帕霉素自噬氧化损伤衰老
分类号：R587.2(内分泌腺疾病及代谢病)R691.6(泌尿科学（泌尿生殖系疾病）)
资助基金：国家重点基础研究计划(973计划)(2011CBA01003)国家重大科学研究计划项目(2011CB964904)国家自然科学基金(30870920)国家自然科学基金(30270505)国家自然科学基金(30070288)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 467-471 )
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