人甘油激酶慢病毒干涉载体的构建和表达
刘悦1
郝玉娥2
詹轶群3
许望翔3
杨永升3
葛常辉3
1.天津大学制药工程系,天津,3000722.军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京100850;南方医科大学基础医学院,广东广州5105153.军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京,100850
摘要：目的 构建人甘油激酶( GK)基因 RNA干扰(RNAi)慢病毒载体,获得稳定下凋GK表达的慢病毒.方法 将具有干涉效果的siRNA序列克隆入慢病毒核心质粒pSicoR中,并转染293T细胞进行病毒包装,用慢病毒感染293T细胞并应用FACS测定病毒滴度.以GK 干涉慢病毒感染人肝细胞系L02细胞后,应用Western blotting方法检测GK的表达 结果 成功构建GK干涉慢病毒pSicoR-GK载体并获得慢病毒颗粒,病毒滴度检测可达3×10 pfu/ml,GK蛋白质表达水平下调至对照的约20％.结论 成功构建人GK基因RNAi慢病毒,为后续GK生物学功能研究奠定基础.
关键词：甘油激酶慢病毒肝细胞重组质粒RNA干扰
分类号：R34(基础医学)Q555.7(酶)
资助基金：国家自然科学基金(30971402)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 614-617 )
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