简易的单个肿瘤干细胞分离及其培养方法
邓永键1
蒋强1
于莉娜1
王红霞1
胡纯婷1
刘超2
丁彦青1
1.南方医科大学南方医院病理科//南方医科大学基础医学院病理学系,广东广州,5105152.南方医科大学南方医院病理科//南方医科大学基础医学院病理学系,广东广州510515;广东省人民医院病理科,广东广州510080
摘要：目的 建立一套简单有效的单个肿瘤干细胞分离及培养方法,提高研究的效率与质量.方法 在火焰上轻烤拉伸后的毛细管,与无菌塑料管连接建立口控毛细管单细胞分离装置.分离单个SW480细胞无血清培养筛选出克隆球,CD133、CK7荧光标记鉴定；消化克隆球吸取单个肿瘤干细胞并移至石蜡油封闭的微滴及96孔板中培养对比观察.结果 SW480细胞克隆形成率约为1.04％,其CD133表达强CK7表达弱；口控毛细管单细胞分离装置分离单个肿瘤干细胞的有效率可高达98.99％;单个肿瘤干细胞在微滴中培养与在96孔板中培养的比较:在分裂时间点上,前两次分裂时间相差无几(P＞0.05),在微滴中培养的细胞后续分裂需时较长；在持续扩增的数量上,微滴培养为11.5％(22/192)而96孔板为9.2％(17/184),两者差异无统计学意义(P＞0.05).结论 单个SW480细胞无血清培养可形成肿瘤干细胞球,口控单细胞分离装置能够有效分离单个肿瘤干细胞,石蜡油封闭微滴培养法和96孔板培养法均能够有效扩增单个肿瘤干细胞.但石蜡油封闭微滴培养法操作灵活、观察便捷、环境稳定,可作为培养单个肿瘤干细胞的首选.
关键词：肿瘤干细胞单细胞分离微滴培养
分类号：R36(病理学)
资助基金：国家自然科学基金(81172381)广东省高等学校科技创新重点项目(cxzd1016)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 802-806 )
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