重组人甘露聚糖结合凝集素三肽链亚单位的制备及其活性分析
雷鸣1
童俊容2
卢晓3
张丽芸3
左大明3
陈政良3
1.南方医科大学免疫学教研室,广东广州510515;广州军区广州总医院肾内科,广东广州5100102.广州军区广州总医院肾内科,广东广州,5100103.南方医科大学免疫学教研室,广东广州,510515
摘要：目的 制备具有生物学活性的重组人甘露聚糖结合凝集素三肽链亚单位(trhMBL).方法 我们先前已构建了N端缺失的重组人甘露聚糖结合凝集素(rhMBL△N)基因的原核表达载体并在大肠杆菌中高效表达rhMBL△N融合蛋白.本实验利用胶原蛋白的3条肽链依其自身性质而相互缠绕成三股螺旋、装配成三级结构的原理,首先以凝血酶酶切rhMBL融合蛋白,将获得的单链rhMBL蛋白在50 mmol/L PBS (pH7.2)和ddH2O中交替反复透析使之自动装配成trhMBL,最后以配体结合试验和C4d沉淀试验对终产物trhMBL进行生物学活性分析.结果 rhMBL融合蛋白经凝血酶酶切,获得相对分子质量约20 000的rhMBL单链蛋白；将其反复透析后得到相对分子质量约50000的rhMBL三肽链亚单位trhMBL;活性分析表明,该MBL亚单位的配体结合活性比rhMBL△N肽链高,并获得了激活补体凝集素途径的活性,但这些活性比天然MBL低.结论 成功获得了具有生物学活性的重组人MBL三肽链亚单位；这种三肽链组织形式不仅是MBL的结构亚单位,而且是其功能亚单位.
关键词：甘露聚糖结合凝集素三聚化亚单位生物学活性
分类号：R392.1(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(30972679)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 1584-1587 )
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