柯萨奇病毒A16型VP1～VP4基因克隆及其表达产物的抗原相关性分析
宋远斌1
何思杰2
余楠2
陈欣欣1
王斌1
车小燕2
曾其毅1
1.南方医科大学珠江医院儿科中心,广东广州,5102822.南方医科大学珠江医院医学检验中心,广东广州,510282
摘要：目的 克隆并表达柯萨奇病毒A16型VP1～VP4蛋白基因,初步分析其抗原相关性.方法 抽提病毒RNA,经RT-PCR方法分别扩增出VP1～VP4蛋白基因片段,经克隆后,在QIA表达系统中表达,表达产物经8 mol/L尿素洗涤及镍柱亲和层析纯化后,用柯萨奇病毒A16型病毒免疫兔血清及肠道病毒7 1型病毒免疫兔血清对重组蛋白进行Western blotting及ELISA分析其抗原相关性及交叉反应性.结果 成功构建的重组质粒pQE30a/VP1～VP4并经IPTG诱导,重组蛋白VP1～VP4高效表达并纯化成功,经Western blotting及ELISA证实重组蛋白VP1～VP4可以被CVA16免疫兔血清特异识别,部分与肠道病毒71型免疫血清存在交叉反应.结论 在大肠杆菌M15中高效表达出柯萨奇病毒A16型VP1～VP4蛋白,经纯化产物具有较强的抗原反应性.
关键词：柯萨奇病毒A16型VP1蛋白VP2蛋白VP3蛋白VP4蛋白克隆原核表达抗原反应性
分类号：R373.23(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
资助基金：国家科技重大专项(2009ZX10004-306)广州市医药卫生科技重大项目(201102A211007)广东省科技计划(2010B031600238)广州市项目(2010J-E421)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1713-1717 )
英文信息