RNA干扰抑制CD133表达对CD133+肝癌干细胞增殖和化疗敏感性的影响
兰曦
王勇
曹姝
邹冬玲
李芳
李少林
1.重庆医科大学放射医学教研室,重庆,4000162.重庆医科大学放射医学教研室,重庆,4000163.重庆医科大学放射医学教研室,重庆,4000164.重庆医科大学放射医学教研室,重庆,4000165.重庆医科大学放射医学教研室,重庆,4000166.重庆医科大学放射医学教研室,重庆,400016
摘要：目的 利用慢病毒介导的RNA干扰技术下调CD133+ HepG2肝癌干细胞中CD133的表达,探讨其对肝癌干细胞增殖及化疗敏感性的影响.方法 利用流式分选技术筛选CD133+ HepG2细胞并检测分选前后CD133表达量,体外成球及体内成瘤实验鉴定其“干性”；随后以CD133 mRNA编码序列为干扰靶点,采用慢病毒介导的shRNA转染CD133+细胞.应用RT-PCR和Western Blot检测CD133 mRNA及蛋白表达,克隆形成实验检测转染前后细胞增殖情况,CCK-8法和流式细胞仪检测在化疗药物顺铂作用下转染前后细胞的生长抑制率及凋亡情况.结果 分选前后CD133表达率分别为(3.36±1.80)％,(88.74±3.19)％；CD133+细胞相对于CD133-细胞有更强的体外成球和体内成瘤能力；转染CD133 shRNA后的细胞CD133 mRNA表达明显受到抑制(P＜0.05),蛋白表达水平降低,增殖能力显著下降(P＜0.01).顺铂对转染CD133 shRNA后细胞生长抑制作用明显提高(P＜0.01),且其在顺铂作用下的凋亡率也显著增加(P＜0.05).结论 慢病毒介导的shRNA能显著下调CD133+肝癌干细胞CD133基因的表达,抑制其增殖并提高其对顺铂的敏感性.
关键词：CD133CD133+肝癌干细胞RNA干扰顺铂
分类号：R735.7(消化系肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(81171365)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 1741-1747 )
英文信息