Let-7d表达质粒的构建及其对卵巢癌细胞高迁移率A2蛋白及ras蛋白表达的抑制作用
叶海燕1
陈建国1
黄小穗2
郭爱林2
郝佩佩3
1.广东省人民医院//广东省医学科学院妇科,,广东广州5100802.广东省人民医院//广东省医学科学院医学研究中心,广东广州,5100803.南方医科大学生物技术学院生物技术系暨分子免疫学研究所,广东广州,510515
摘要：目的 构建let-7d真核表达载体,研究let-7d对卵巢癌细胞生物学行为及蛋白表达的影响.方法 根据let-7d序列设计合成microRNA片段,定向克隆到pcDNATM6.2GW/EmGFPmiR真核表达载体上,运用基因转染技术将其导入卵巢癌IGROV1细胞中,使let-7d基因过表达,以实时荧光定量PCR验证let-7d及高迁移率A2(HMGA2)基因的表达,并用Western blotting检测相关蛋白HMGA2的差异表达.以MTT绘制细胞生长曲线,流式细胞术检测细胞凋亡率,分析let-7d对IGROV1细胞增殖生长的影响.结果 成功构建针对靶向let-7d的表达质粒,将表达质粒转染人卵巢癌IGROV1细胞后,明显下调HMGA2的表达水平,而下调ras蛋白的作用较弱,没有前者明显.细胞表型研究显示,抑制HMGA2表达可能改变该细胞的恶性表型,表现在细胞增殖能力明显下降,自发凋亡率明显增加等.结论 Let-7d通过对HMGA2的调控,在改变卵巢癌IGROV1细胞恶性表型方面可能起重要作用.
关键词：let-7卵巢癌高迁移率蛋白A2ras
分类号：R34(基础医学)R737.31(泌尿生殖器肿瘤)
资助基金：广东省科技计划(2008B060600037)广东省自然科学基金(A2008004;0151008004000033)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 1752-1757 )
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