Hsa-miR-186在结肠癌细胞中的表达及作用
陈芳
周畅
陆艳霞
袁理
彭璠莉
郑林
李学农
1.南方医科大学基础医学院病理学系//广东省分子肿瘤病理学重点实验室,广东广州,5105152.南方医科大学基础医学院病理学系//广东省分子肿瘤病理学重点实验室,广东广州,5105153.南方医科大学基础医学院病理学系//广东省分子肿瘤病理学重点实验室,广东广州,5105154.南方医科大学基础医学院病理学系//广东省分子肿瘤病理学重点实验室,广东广州,5105155.南方医科大学基础医学院病理学系//广东省分子肿瘤病理学重点实验室,广东广州,5105156.南方医科大学基础医学院病理学系//广东省分子肿瘤病理学重点实验室,广东广州,5105157.南方医科大学基础医学院病理学系//广东省分子肿瘤病理学重点实验室,广东广州,510515
摘要：目的 检测hsa-miR-186在结肠癌组织及细胞中的表达,探讨hsa-mir-186对结肠癌细胞生物学特性的影响及作用.方法 应用实时荧光定量PCR检测了miR-186在12对配对的结肠癌组织、癌旁组织和5株结肠癌细胞中的表达情况；扩增包含miR-186前体序列在内的基因片段,并将其克隆至PLVTHM载体,将PLVTHM-miR186质粒转染SW620细胞,流式分选慢病毒感染的SW620细胞；CCK-8法、划痕实验和Transwell检测细胞检测细胞的增殖、迁移和侵袭能力.Western Blot检测靶基因YY1蛋白水平的表达.结果 与癌组织相比,12例癌组织中miR-186的平均表达量为0.0024±0.0027,显著低于癌旁组织的0.066±0.068,P=0.008;miR-186在高转移潜能的人结肠癌细胞SW620和LOVO相对表达量分别为0.118±0.138和0.157±0.001,与在低转移潜能HT-29细胞中表达量1.000±0.00,差异具有统计学意义P＜0.05;质粒双酶切及测序鉴定PLVTHM-hsa-miR186重组质粒构建成功；荧光定量PCR表明稳定过表达miR-186的结肠癌细胞株SW620构建成功,且过表达miR-186后降低了细胞的增殖、迁移及侵袭能力,差异均具有统计学意义P＜0.05.稳定过表达miR-186的细胞中,miR-186的表达明显高于对照组和未处理组,YY1蛋白质水平有所下降.结论 hsa-miR-186在结肠癌组织以及在高转移潜能的人结肠癌细胞SW620、LOVO中低表达,具有类似抑癌基因的作用；成功构建PLVTHM-miR186慢病毒重组质粒,并稳定转染结肠癌细胞SW620,抑制了细胞的增殖、迁移和侵袭能力.miR-186调控YY1表达可能是抑制结直肠癌生物特性的重要机制之一.
关键词：结肠癌细胞hsa-miR-186慢病毒增殖迁移侵袭
资助基金：国家自然科学基金(30871156)国家自然科学基金(81272758)广东省科技计划项目(2007B031001001)广东省科技计划项目(2009B030803041)
论文发表日期：2013-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 654-660 )
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