基于同源加尾系统的4种腹泻病毒的多重RT-PCR检测方法
滕勇勇1
莫秋华2
王琪2
唐明慧2
赵德坚1
谭华2
涂承宁2
杨泽2
陈清1
1.南方医科大学公共卫生与热带医学学院流行病学系,广东广州,5105152.珠海出入境检验检疫局,广东珠海,519020
摘要：目的 针对轮状病毒、诺如病毒、星状病毒和扎如病毒四种常见腹泻病毒,建立基于同源加尾(Homo-Tag Assisted Non-Dimer,HAND)系统的一步法四重RT-PCR检测方法.方法 根据4种病毒基因组保守序列设计引物并在5'端加上同源尾巴序列.通过优化通用尾巴引物和特异性加尾引物的浓度等PCR参数构建四重RT-PCR反应体系,并系统评价其稳定性、特异性和灵敏度.结果 成功建立基于HAND系统的4种腹泻病毒一步法多重RT-PCR检测方法.特异性分析显示四种病毒间无交叉反应,灵敏度分析显示轮状病毒、诺如病毒、星状病毒和扎如病毒的检测下限分别达到48、9.6、1.92和48 pg.结论 所建立的基于HAND系统的4种腹泻病毒多重RT-PCR检测方法简便快速、灵敏特异稳定、成本低廉,非常适用于基层医学实验室.
关键词：多重RT-PCRHAND系统轮状病毒诺如病毒星状病毒扎如病毒
资助基金：传染病监测技术平台项目(2009ZX10602-02)珠海市科技计划(PC20081002)珠海出入境检验检疫局科技项目(ZH2009-4)
论文发表日期：2013-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 724-727 )
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