肽核酸钳制PCR早期检测乙型肝炎病毒YMDD耐药变异
张迎迎
何海棠
杨洁
侯金林
1.南方医科大学南方医院感染内科,广东广州,5105152.南方医科大学南方医院感染内科,广东广州,5105153.南方医科大学南方医院感染内科,广东广州,5105154.南方医科大学南方医院感染内科,广东广州,510515
摘要：目的 建立乙型肝炎病毒肽核酸钳制PCR(PNA-PCR)耐药监测方法,以提前监测乙型肝炎病毒YMDD耐药株的产生.方法 选取rtM2041(ATT)、rtM204V(GTG)突变型质粒与野生型质粒rtM204(ATG)按照不同比例混合后,用PNA-PCR法及直接测序法对耐药位点进行检测,评价两种方法的灵敏度及特异性；选取临床耐药检测患者血清标本85例,采用PNA-PCR法及直接测序法进行耐药检测,比较两种方法的耐药检出率.结果 PNA-PCR法可在105倍野生型YMDD基因背景下检测出突变,灵敏度为0.001％,可检测到最低限为101拷贝.而直接测序法可检测的基因突变的最低极限为104拷贝,检测灵敏度为10％.85例临床耐药检测患者中,PNA-PCR法YMDD检测阳性率为85.9％(73/85:YIDD:40,YVDD:23,YIDD+YVDD:10),而PCR产物直接测序法检阳性率仅为40％ (34/85:YIDD:21,YVDD:11,YIDD+YVDD:2).阴性对照,两种方法均未测出HBV病毒,两种方法的特异性均较好.结论 PNA-PCR方法在灵敏度及特异性上均优于直接测序法,而且操作简便,快捷,在科研和临床上都有很好的应用前景.
关键词：乙型肝炎病毒肽核酸钳制PCR直接测序法
资助基金：国家自然科学基金(30872245)National Natural Science Foundation of China(30872245)
论文发表日期：2013-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 853-856 )
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