Nestin转基因小鼠模型的建立及nestin基因在器官中的表达
郑文宏1
李振林2
贾俊双1
安靓1
1.南方医科大学肿瘤研究所,广东广州,5105152.南方医科大学组织胚胎教研室,广东广州,510515
摘要：目的 构建人nestin基因表达载体,制备nestin过表达转基因小鼠.方法 以人神经胶质瘤细胞株U251的cDNA为模板,分3段扩增出nestin基因eDNA全序列,并将其克隆入含有强启动子ROSA26的pBROAD3载体,酶切鉴定、测序,除去原核序列,纯化.显微原核注射建立转基因小鼠.PCR验证nestin基因整合,确定建立首建者.将阳性鼠传代.Westemblot方法检测F3代转基因小鼠与野生型小鼠主要器官(心、肺、脑、肾)的nestin表达.结果 测序结果证明成功构建了受ROSA26启动子调控的nestin转基因载体.出生34只小鼠,PCR检测证实存在首建者2只.Westemblot方法证实,与野生型小鼠相比,F3代转基因小鼠脑、肺组织存在较高水平nestin表达.结论 首次成功建立nestin过表达转基因小鼠,外源基因可遗传到子代并在脑和肺组织中稳定表达,为深入研究nestin在肿瘤转移、细胞“干性”的维持和细胞的分化等功能提供了良好的实验动物模型.
关键词：nestin基因ROSA26启动子转基因小鼠
论文发表日期：2013-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1155-1159 )
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