细胞角蛋白8 GFP/Puro双标干涉慢病毒系统的构建及对细胞凋亡的影响
金延超1
尹荣华2
郑巍薇2
孔祥祯1
詹轶群2
杨晓明2
李长燕2
1.天津大学制药工程系,天津,3000722.军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京,100850
摘要：目的：构建细胞角蛋白8（CK8）的双标慢病毒干涉载体，获得高滴度慢病毒颗粒，感染HCT116细胞建立稳定株，检测CK8敲低对细胞凋亡的影响。方法将CK8的siRNA序列插入慢病毒表达载体GV248，并与包装质粒PMD、SPA共转染293T细胞，36、48 h分两次收集慢病毒上清，应用流式细胞术检测病毒滴度。获得的病毒感染HCT116细胞，用嘌呤霉素筛选阳性细胞， Western blotting检测干涉效果。采用Annexin V/PI染色检测干涉CK8对化疗药物顺铂诱导的细胞凋亡的影响。结果与结论成功构建CK8干涉慢病毒载体并得到干涉稳定株，在HCT116细胞中干涉CK8使细胞对顺铂引起的凋亡更加敏感。
关键词：细胞角蛋白8GFP/Puro双标慢病毒RNAi凋亡顺铂
论文发表日期：2013-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1761-1765 )
英文信息