miRNAs慢病毒文库筛选靶向EZH23'非翻译区的新型miRNAs及其在乳腺癌中的表达
刘萃萃1
王璐璐2
赵卫卫2
彭攸2
王玉平2
孙振亮2
冯景2
1.南方医科大学第三临床医学院，广东 广州 510515; 南方医科大学附属奉贤医院检验科，上海 2014002.南方医科大学附属奉贤医院检验科,上海,201400
摘要：目的：重组过表达EZH2基因3'非翻译区的MCF-7细胞株中筛选靶向miRNAs，并进行细胞和组织定量分析。方法重组细胞株感染慢病毒文库，利用细胞毒性药物筛选后抽提细胞基因组，以此为模板PCR扩增出miRNA前体，测序确定miRNAs名称，并对其进行PCR定量分析。结果在重组细胞株中共筛选出7种miRNAs，依次为miR-15b、miR-16-2、miR-181b2、miR-217、miR-224、miR-329-1、miR-487b，这些新型miRNAs用生物信息学软件PicTar和TargetScan无法预测。Real-time PCR发现，与乳腺癌细胞MCF-7相比，正常乳腺细胞株HBL-100中miR-217、miR-329-1、miR-487b高表达；乳腺癌组织中仅miR-15b及miR-16-2表达增加，与癌旁组织相比差异有统计学意义（P<0.05）。结论在重组过表达EZH23'-UTR的乳腺癌MCF-7细胞株中结合慢病毒文库可筛选出用生物信息学软件未预测的新型靶向miRNAs，这些新型miRNA在正常乳腺细胞与肿瘤细胞及组织中存在差异表达。
关键词：乳腺癌EZH23’UTRmiRNA慢病毒文库
论文发表日期：2014-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 368-372 )
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