造血干细胞移植后巨细胞病毒药敏检测及UL97基因突变分析
曾爱红1
董德坤1
崔喜梅1
郭明明1
邹德志1
方建培2
1.中山大学附属一院急诊科,广东 广州,5100802.中山大学附属孙逸仙纪念医院儿科,广东 广州,510120
摘要:目的:通过表型和基因型分析方法,初步了解造血干细胞移植术后巨细胞病毒(HCMV)感染患儿的耐药情况。方法采用人包皮成纤维细胞培养分离并鉴定HCMV临床株;Reed.Muench法测定其半数组织培养感染量(TCID50),空斑减数实验测定病毒对丙氧鸟苷的敏感性,同时以HCMV UL97基因为靶序列,用Nested-PCR扩增目的基因,并对PCR产物做直接序列测定。结果成功从患者尿标本中分离出HCMV临床病毒株,测得其TCID50为:10-4.618/0.1 ml;IC50值为5.847μmol/L,对丙氧鸟苷高度敏感;同时基因序列与AD169株的序列相比较,发现四个位点发生碱基突变,分别是1509 T→C、1575 C→T、1794 T→C、1815 C→G;上述突变的编码子分别为503,525、598和605,前3个位点的突变未导致相应氨基酸改变,第四个位点氨基酸则改变为D605E,未发现与耐药有关的基因突变。结论初步建立造血干细胞移植后HCMV耐药表型和基因型检测的实验方法,本次试验从临床标本中尚未发现HCMV耐药现象。
关键词:人巨细胞病毒耐药丙氧鸟苷基因突变
资助基金:广东省科技计划(2008B030301080)
论文发表日期:2014-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 519-522 )
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南方医科大学学报

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北大核心CSTPCD
ISSN:1673-4254
年,卷(期):2014,(4)
所属栏目:基础研究