HuR蛋白118位苏氨酸对热应激状态下的双特异性磷酸酶1的转录后调控
张传丽
罗海华
姜勇
1.南方医科大学病理生理教研室/广东省蛋白质组学重点实验室,广东 广州,5105152.南方医科大学病理生理教研室/广东省蛋白质组学重点实验室,广东 广州,5105153.南方医科大学病理生理教研室/广东省蛋白质组学重点实验室,广东 广州,510515
摘要：目的：探讨RNA结合蛋白HuR 118位苏氨酸对热应激状态下的双特异性磷酸酶1（DUSP1）转录后调控机制。方法构建HuR 118位苏氨酸突变体真核表达质粒，并用脂质体转染NIH 3T3细胞，Real-time PCR检测其对DUSP1 mRNA水平的影响， Western blotting检测其对DUSP1蛋白表达的效应。结果（1）小鼠HuR不同突变体真核表达载体质粒构建成功；（2）热休克刺激后，HuR T118磷酸化明显增强；（3）过表达HuR(WT)与HuR（T118E），经过热休克刺激后，DUSP1 mRNA水平明显升高，其蛋白表达也有上调；过表达HuR(T118E)时，DUSP1的mRNA水平明显上调，而蛋白水平在热休克刺激前后均上调，其表达变化无差异而过表达HuR（T118A），热休克刺激前后DUSP1 mRNA水平及蛋白表达均下调；（4）热休克刺激下，HuR（WT）可以从细胞核内转位到细胞质并形成颗粒；当过表达HuR（T118E）时，在静息状态下，HuR（T118E）弥散分布于细胞质，热休克刺激会使其在细胞质形成明显的颗粒；而过表达HuR（T118A）时，热休克刺激并不能使其移位出核。结论 RNA结合蛋白HuR参与了DUSP1的转录后调控，可以通过其118位的苏氨酸磷酸化提高热休克刺激后的DUSP1的基因及蛋白水平。
关键词：HuR蛋白双特异性磷酸酶1转录后调控
资助基金：国家自然科学基金(81030055，81372030)广东省自然科学基金(S2013010014422)Supported by National Natural Science Foundation of China (81030055，81372030)
论文发表日期：2014-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 766-770 )
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