稳定过表达mir-101结直肠癌细胞株的建立及其靶基因的鉴定
刘燕
陆滟霞
周敏
张超
李学农
1.南方医科大学病理学系/广东省分子肿瘤病理学重点实验室,广东 广州,5105152.南方医科大学病理学系/广东省分子肿瘤病理学重点实验室,广东 广州,5105153.南方医科大学病理学系/广东省分子肿瘤病理学重点实验室,广东 广州,5105154.南方医科大学病理学系/广东省分子肿瘤病理学重点实验室,广东 广州,5105155.南方医科大学病理学系/广东省分子肿瘤病理学重点实验室,广东 广州,510515
摘要：目的：构建稳定过表达mir-101的SW620细胞亚株并鉴定mir-101的靶基因。方法运用荧光定量PCR技术检测结直肠癌细胞株中mir-101的表达水平。利用GV209-mir101慢病毒感染SW620细胞，建立稳定过表达mir-101的细胞株。扩增包含mir-101结合位点的RAC13'UTR基因片段并将其亚克隆至psiCHECK-2载体，对此重组载体进行定点突变构建psiCHECK-2-Rac1-Mut；并用双萤光素酶报告实验检测RAC13'UTR相对荧光素酶活性。结果稳定过表达mir-101的细胞株中，mir-101的表达明显高于对照组。双萤光素酶报告实验证实mir-101 inhibitors可以上调3'UTR相对荧光素酶活性。稳定过表达mir-101， RAC1表达下调；而干扰mir-101之后RAC1表达上调。结论成功构建稳定过表达mir-101的SW620细胞亚株。RAC1是mir-101的靶基因。
关键词：结直肠癌mir-101慢病毒双荧光素酶报告实验RAC1
资助基金：国家自然科学基金(81272758，81302158)Supported by National Natural Science Foundation of China (81272758，81302158)
论文发表日期：2014-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 928-933 )
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