大鼠骨髓间充质干细胞的分离与培养方法优化
祝旭龙1
颜谭1
姚维杰2
王永恒2
程冲2
向俊西3
吕毅3
高庆东1
李建辉2
GAO Qingdong4
LI Jian-hui4
1.陕西省人民医院/西安交通大学第三附属医院肿瘤外科,陕西 西安 710068; 延安大学医学院,陕西 延安7160002.陕西省人民医院/西安交通大学第三附属医院肿瘤外科,陕西 西安,7100683.西安交通大学第一附属医院肝胆外科,陕西 西安,7100614.Department of Surgical 0ncology, Shaanxi Provincial People's Hospital/Third Affiliated Hospital of Xi'an Jiaotong University, Xi'an 710068, China
摘要:目的:建立一个分离、培养、纯化大鼠的骨髓间充质干细胞的方法。方法使用贴壁法分离大鼠的骨髓间充质干细胞,通过培养初期的频繁换液和传代过程中减少胰蛋白酶的暴露时间,达到骨髓间充质干细胞的纯化。流式细胞仪检测细胞表面标志物,MTT法检测细胞生长状况,暴露于不同的诱导培养基使细胞成骨、成脂,并向肝胆系分化。结果分离所得的细胞阳性表达CD29、CD44、CD90,而对于造血细胞标志物CD45呈阴性。在成骨、成脂培养基的诱导下,细胞ALP、茜素红、油红O染色均呈阳性,并发现传至10代的细胞仍保持分化功能。将骨髓间充质干细胞贯续暴露于不同的细胞因子和激素,得到了表达肝细胞、胆管上皮细胞特异标志的子代细胞。结论通过改良后的方法可以高效、简洁地分离出形态均一的大鼠骨髓间充质干细胞,并能够向多胚层的细胞分化。
关键词:骨髓间充质干细胞分离与培养肝细胞胆管上皮细胞大鼠
论文发表日期:2014-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:7( 1621-1626,1631 )
英文信息
