神经干细胞特异性PPARγ基因敲除小鼠模型的制备与鉴定
吴巧琪
章红妍
王震
林利芳
陈璐
王雪敏
1.南方医科大学基础医学院神经生物学教研室,广东 广州,5105152.南方医科大学基础医学院神经生物学教研室,广东 广州,5105153.南方医科大学基础医学院神经生物学教研室,广东 广州,5105154.南方医科大学基础医学院神经生物学教研室,广东 广州,5105155.南方医科大学基础医学院神经生物学教研室,广东 广州,5105156.南方医科大学基础医学院神经生物学教研室,广东 广州,510515
摘要:目的:制备与鉴定神经干细胞特异性PPARγ基因敲除小鼠模型。方法将引进的2种转基因小鼠B6.PPARγloxp/loxp、B6. Nestin-Cre进行饲养并杂交繁殖,将子一代小鼠与B6.PPARγloxp/loxp小鼠回交获得子二代小鼠,提取子二代小鼠的基因组DNA,利用PCR方法扩增Cre和loxp基因片段,并进行琼脂糖凝胶电泳检测。选取基因型为B6.PPARγloxp/loxp.Nestin-Cre (KO)的小鼠即为神经干细胞特异性敲除PPARγ的敲除小鼠,另选基因型为B6.PPARγloxp/loxp(loxp)作为对照组小鼠。应用RT-PCR、实时荧光定量PCR方法鉴定神经干细胞特异性敲除PPARγ的敲除小鼠。结果敲除小鼠在基因鉴定时可以扩增得到PPARγloxp和Cre两个条带,在mRNA表型检测时脑内PPARγ表达显著低于对照组小鼠。成功获得神经干细胞敲除PPARγ基因的敲除小鼠。所购2种转基因小鼠均有繁殖能力,其繁殖符合孟德尔遗传规律。结论基于loxp-Cre系统成功构建神经干细胞特异性敲除PPARγ的基因敲除小鼠,为进一步的神经系统疾病的治疗及其机制研究提供模型基础。
关键词:PPARγ基因敲除Cre-loxp系统
资助基金:国家自然科学基金(81071016)Supported by National Natural Science Foundation of China (81071016)
论文发表日期:2014-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 1768-1771 )
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