VHL慢病毒表达和干扰载体的构建及对肾癌细胞增殖和凋亡的影响
沈东来
马鑫
张瑜
高宇
李新涛
顾良友
巩会杰
牛少曦
张旭
1.中国人民解放军总医院泌尿外科肾脏疾病国家重点实验室,北京,1008532.中国人民解放军总医院泌尿外科肾脏疾病国家重点实验室,北京,1008533.中国人民解放军总医院泌尿外科肾脏疾病国家重点实验室,北京,1008534.中国人民解放军总医院泌尿外科肾脏疾病国家重点实验室,北京,1008535.中国人民解放军总医院泌尿外科肾脏疾病国家重点实验室,北京,1008536.中国人民解放军总医院泌尿外科肾脏疾病国家重点实验室,北京,1008537.中国人民解放军总医院泌尿外科肾脏疾病国家重点实验室,北京,1008538.中国人民解放军总医院泌尿外科肾脏疾病国家重点实验室,北京,1008539.中国人民解放军总医院泌尿外科肾脏疾病国家重点实验室,北京,100853
摘要：目的：构建人VHL重组慢病毒表达载体及干扰载体，建立稳定转染细胞株，观察VHL对肾癌细胞株增殖和凋亡的影响。方法构建pZsGreen1-VHL及pLL3.7-shVHL重组慢病毒载体，与3质粒包装系统用脂质体法共同转染293T细胞，包装成病毒颗粒，分别感染A498、Caki-1细胞，并进行RT-PCR和Western blot检验细胞中VHL的表达。用MTS法和流式细胞仪检测VHL对肾癌细胞增殖和凋亡效应的影响。结果重组慢病毒载体及稳定转染细胞株构建成功，转染后VHL在细胞中表达明显变化；VHL过表达细胞的增殖速度明显低于各对照组，而凋亡率明显高于各对照组；VHL干扰细胞的增殖速度明显高于各对照组，而凋亡率明显低于各对照组（P<0.05）。结论 VHL对肾癌细胞具有抑制增殖和诱导凋亡的作用。
关键词：慢病毒载体VHL基因增殖凋亡肾肿瘤
资助基金：国家高技术研究发展计划(863计划)(2012AA021101，2014AA020607)Supported by National High Technology Research and Development Program of China (2012AA021101，2014AA020607)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 348-354 )
英文信息