磷脂转运蛋白参与烟草提取物诱导的Ⅱ型肺泡上皮细胞凋亡
廖科1
陈虹1
赵绿翠2
巫凤苹1
陈亚娟1
1.重庆医科大学附属第一医院呼吸科,重庆,4000162.重庆医科大学药物高校工程研究中心,重庆,400016
摘要:目的:研究磷脂转运蛋白(PLTP)在烟草提取物对大鼠Ⅱ型肺泡上皮凋亡中的作用。方法体外培养大鼠肺泡上皮RLE-6TN细胞株24 h,分别加入0.5%,1.0%和2.0%烟草提取物共培养24 h或48 h;委托上海吉玛公司合成siRNA-PLTP,并将siRNA-PLTP转染入RLE-6TN中,下调PLTP的表达后,观察烟草烟雾对RLE-6TN细胞凋亡的影响。Hochest染色后观察细胞核的形态学改变;流式细胞术检测细胞凋亡率;蛋白质印迹法(Western blot)检测PLTP的表达量和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3的活性。结果经不同浓度的(0.5%,1.0%,2.0%)烟草提取物作用后,细胞早期凋亡率由(1.68±0.098)%增加至(18.663±0.964)%(P<0.001);Hoechst染色可见部分凋亡细胞,核发白、固缩、染色质边集等现象;PLTP的表达和caspase-3的活性增加;将PLTP敲降后,可部分逆转烟草提取物诱导的RLE-6TN细胞中caspase-3的活性的增加(P<0.05)。结论 PLTP参与烟草提取物诱导大鼠肺泡上皮细胞的凋亡。
关键词:烟草提取物大鼠肺泡上皮细胞凋亡磷脂转运蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3
资助基金:国家自然科学基金(81200009)重庆市卫生局中医药研究项目(ZY20132165)
论文发表日期:2015-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:6( 941-946 )
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