骨髓间充质干细胞体外培养及肝向分化方案的优化
向俊西1
郑幸龙1
祝旭龙2
杨丽斐3
高睿3
李建辉2
刘学民1
吕毅1
1.西安交通大学第一附属医院肝胆外科,陕西 西安 710061;西安交通大学先进外科技术与工程研究所,陕西 西安 7100612.西安交通大学第一附属医院肝胆外科,陕西 西安 710061;陕西省人民医院肿瘤外科，陕西西安7100683.西安交通大学先进外科技术与工程研究所,陕西 西安,710061
摘要：目的 优化一套简便、可靠、稳定的大鼠骨髓间充质干细胞分离、培养、鉴定及肝向分化的方案.方法 采用全骨髓差速贴壁法分离提取大鼠骨髓间充质干细胞,通过优化的1.5 h差速贴壁结合12 h首次全量换液方法,及体外改良培养方案实现细胞高效纯化扩增.流式细胞术表面标志物检测结合成脂、成骨、成软骨诱导分化鉴定细胞群.采用添加bFGF、HGF、EGF等多种生长因子的三步诱导法促使骨髓间充质干细胞向肝系分化,并进行形态学、免疫学、基因水平评估.结果 分离纯化的细胞群阳性表达CD29、CD44、CD90,阴性表达CD34、CD45,经成脂、成骨、成软骨诱导液作用后,油红O、茜素红、甲苯胺蓝染色均呈阳性.经三步法肝向诱导处理后,细胞群呈肝样细胞形态改变,表达肝脏特异性标志物ALB、AFP,肝系相关基因表达水平呈时间依赖性逐渐上升.结论 优化后的方案能够简便、可靠、稳定地获得高纯度的大鼠骨髓间充质干细胞,并能在特定微环境作用下实现肝向分化.
关键词：骨髓间充质干细胞体外培养肝向分化
资助基金：高等学校博士学科点专项科研基金(20110201130009)陕西省科学技术研究发展计划国际科技合作项目(2012KW-39-01)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 1090-1096 )
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