兔抗弓形虫Ⅰ型液泡型质子焦磷酸酶多克隆抗体的制备及鉴定
佟澄碧
郝文波
罗树红
肖斌
程莎莎
廖小青
潘迪
1.南方医科大学生物技术学院,广东 广州,5105152.南方医科大学生物技术学院,广东 广州,5105153.南方医科大学生物技术学院,广东 广州,5105154.南方医科大学生物技术学院,广东 广州,5105155.南方医科大学生物技术学院,广东 广州,5105156.南方医科大学生物技术学院,广东 广州,5105157.南方医科大学生物技术学院,广东 广州,510515
摘要：目的 制备兔抗弓形虫I型液泡型质子焦磷酸酶(TgVP1)多克隆抗体并鉴定其应用.方法 选择弓形虫ME49株TgVP1氨基酸序列中的两条多肽,TgVP1-1与TgVP1-2,进行人工合成,并将其与KLH偶联作为抗原免疫新西兰大耳白兔,收集血清制备多克隆抗体,并通过ELISA、Western blot、免疫荧光等方法进行鉴定.结果 经间接ELISA测定,兔抗TgVP1-1及TgVP1-2的多克隆抗体效价均达1:128 000;Western blot结果显示两种多抗均能识别弓形虫天然蛋白中85 000左右条带,与TgVP1预测相对分子质量大小相符,且特异性较好;通过免疫荧光技术检测到两株多抗识别的蛋白均定位于细胞质中,与酸性钙体的分布相同.结论 采用人工合成多肽为免疫原所获得的兔抗TgVP1多克隆抗体效价高,特异性好,弓形虫TgVP1和酸性钙体的深入研究奠定了基础,同时也为弓形虫病的诊断提供了新的有效工具.
关键词：弓形虫焦磷酸酶酸性钙体多克隆抗体
资助基金：国家自然科学基金(81171608)Supported by National Natural Science Foundation of China (81171608)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 1137-1142 )
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