绿色荧光蛋白为报导基因快速筛选重组羊痘病毒表达载体
张佳纯
郭先凤
张敏
伍菲凡
彭永正
1.南方医科大学珠江医院检验医学部,广东 广州,5102822.南方医科大学珠江医院检验医学部,广东 广州,5102823.南方医科大学珠江医院检验医学部,广东 广州,5102824.南方医科大学珠江医院检验医学部,广东 广州,5102825.南方医科大学珠江医院检验医学部,广东 广州,510282
摘要：目的 利用绿色荧光蛋白(GFP)为报导基因,构建通用、高度减毒的外源基因表达载体IA82△121-V.方法 抽提病毒DNA,扩增ORFV132左右同源臂,构建穿梭质粒pSPV-132LF-EGFP-132RF;转染OFTu细胞,与羊痘病毒IA82△121同源重组,通过荧光信号筛选重组体IA82△121-V,PCR及测序鉴定,并经病毒滴定、体外血管内皮细胞增殖实验以检测ORFV132缺失后的功能变化.结果 成功快速筛选出重组羊痘病毒IA82△121-V,初步判断ORFV1 32的缺失不影响病毒体外的生长复制功能,但是减轻了其毒力.结论 利用GFP为报导基因能简单、快速、稳定地筛选出重组羊痘病毒,高度减毒的重组羊痘病毒IA82△121-V有望成为新一代外源基因表达载体.
关键词：羊痘病毒绿色荧光蛋白同源重组
资助基金：国家自然科学基金(81441066)广东省自然科学基金(S2013010014850)Supported by National Natural Science Foundation of China(81441066)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 67-72 )
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