TALEN介导的MYH9基因沉默及对细胞周期与凋亡的影响
朱显军
邓海军
叶耿泰
沈智勇
李风萍
郭伟洪
杨庆斌
刘浩
李国新
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摘要:目的:利用TALEN技术敲除人胃癌细胞系MGC803细胞株MYH9基因,观察MYH9基因沉默后细胞周期及凋亡改变。方法根据斯丹赛FastTALETM TALEN试剂盒说明书,设计并构建靶向MYH9基因的TALEN质粒对。通过质粒转染、DNA测序、RT-PCR和Western blot等检测质粒活性,成功挑取MYH9基因敲低单克隆株,并对构建好的细胞株进行周期和凋亡检测。结果成功挑选的MGC803单克隆细胞株未检测到MYH9基因完全敲除;MYH9基因敲低后,MGC803细胞周期受阻于G2/M期(P<0.05),早期凋亡增加(P<0.05)。结论利用TALEN技术成功构建MGC803细胞MYH9基因敲低单克隆株,该模型有助于后期深入探讨胃癌MYH9基因功能。
关键词:TALEN技术MYH9细胞周期细胞凋亡
资助基金:国家高技术研究发展计划(863计划)(2012AA021103)公益性行业科研专项(201402015)国家科技支撑计划(2013BAI05B0503)广东省省级科技计划项目(2014A020212629)2015年南方医院院长基金(2015C020)高等学校博士学科点专项科研基金(20124433110010)国家临床重点专科建设项目Supported by National High Technology Research and Development Program of China (2012AA021103)
论文发表日期:2016-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:6( 375-380 )
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