S期H1299细胞热损伤后的延迟性DNA双链断裂
孙婷1
丁为民1
李凌2
张彦2
1.南方医科大学珠江医院肿瘤中心,广东 广州,5102822.南方医科大学公共卫生与热带医学学院三级生物安全实验室,广东 广州,510515
摘要：目的：研究S期细胞热损伤后DNA双链断裂形成规律，以阐明S期细胞热敏感原因，并分析DNA双链断裂延迟性形成的可能机制。方法流式细胞术分析热损伤后细胞周期阻滞；EdU掺入实验检测DNA复制能力；血清饥饿法同步H1299细胞周期；中性彗星实验动态观察热损伤后DNA双链断裂形成；台盼蓝拒染实验研究热损伤后细胞存活率；蛋白免疫印记实验检测ATM磷酸化及DNA结合RAD18情况。结果流式结果显示H1299细胞经45℃热损伤1 h后S期细胞较未加热组明显增多（P<0.01）；热损伤后EdU阳性率随时间变化趋势同S期比例变化；S期细胞热损伤后需经37℃正常孵育一定时间方可观察到“彗星拖尾”现象，且随着正常孵育时间延长，反映DNA双链断裂的尾力矩值越大；台盼蓝拒染实验显示S期细胞受热后7.5 h内死亡率保持较低水平，之后细胞死亡加速；热损伤后ATM磷酸化先增多后减少，热损伤导致DNA结合RAD18明显减少。结论细胞热损伤后可发生S期阻滞，阻滞期间因复制继续、DNA损伤修复抑制而延迟形成的致死性DNA双链断裂是S期细胞热敏感的可能原因。
关键词：H1299细胞热损伤细胞周期阻滞DNA双链断裂
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 472-476 )
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