PCR毛细管电泳法检测嗜水气单胞菌gyrB和16SrRNA基因:溺死诊断方法
麦柏盛1
徐曲毅2
刘超3
赵建3
韩雅莉1
1.广东工业大学轻工化工学院,广东广州,5100062.广东工业大学轻工化工学院,广东广州510006;广州市刑事科学技术研究所,公安部法医病理学重点实验室,广东广州5100003.广州市刑事科学技术研究所,公安部法医病理学重点实验室,广东广州510000
摘要：目的 建立嗜水气单胞菌gyrB和16SrRNA基因PCR毛细管电泳检测方法,探讨它们在淡水溺死诊断中的应用价值.方法 提取人、18种浮游生物(白色念珠菌、嗜水气单胞菌及16种藻类),以及经微波消解-真空抽滤-电镜扫描法检测过的30例尸体(其中生前淡水溺死28例,陆地自然死亡2例)的组织样本的DNA(肺、肝、肾各1份例),分别使用引物AH(gyrB基因)及引物Ah(16SrRNA基因)进行扩增,扩增产物用毛细管电泳法检测.结果 人、白色念珠菌、16种藻类DNA扩增后毛细管电泳检测结果均为阴性,而嗜水气单胞菌结果均为阳性,其产物大小分别为195 bp,350bp.分别利用引物AH和Ah对28例淡水溺死尸体样本肺、肝、肾进行PCR毛细管法进行检测,嗜水气单胞菌的检出率:AH分别为96.4％,71.4％,60.7％;Ah分别为75.0％,42.9％,32.1％,计算得到溺死者的体循环脏器中嗜水气单胞菌检验的总阳性率分别为82.1％,53.6％,2例陆地自然死亡案件尸体样本检测结果均为阴性.两对引物AH与Ah对嗜水气单胞菌检出率有显著性差异(P＜0.05).结论 PCR毛细管电泳法检测嗜水气单胞菌gyrB基因用于诊断淡水溺死灵敏度较高,可作为诊断的辅助性方法;联用16SrRNA基因可提高该菌的检出率,增强MD-VF-Auto SEM法诊断淡水溺死的证据力.
关键词：法医病理学溺死嗜水气单胞菌PCR毛细管电泳
资助基金：能力建设项目(2015A020217001)公安部技术研究计划项目(2015JSYJA03)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1550-1554 )
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