琼脂磁珠消减SELEX技术筛选HIV gp41抗原适配体
栗坤1
修尘林1
高立明2
石明1
翟越3
1.燕山大学环境与化学工程学院,河北秦皇岛,0660042.秦皇岛市第一人民医院肿瘤科,河北秦皇岛,0660043.燕山大学燕山大学校医院内科,河北秦皇岛,066004
摘要：目的 通过消减SELEX技术筛选得到高特异性、强亲和力的HIV gp41抗原适配体,为HIV的早期诊断提供了新的检测技术.方法 以琼脂磁珠为载体,HIV gp41抗原为靶标分子,利用消减SELEX技术和实时定量-PCR技术,筛选得到HIV gp41抗原适配体.结果 通过6轮筛选,筛选得到的次级ssDNA库通过PCR扩增得到dsDNA,dsDNA与pMDTM 18载体链接,进行克隆、测序,获得4条HIV gp41抗原适配体.获得的4条适配体亲和力(Kd)均在纳摩尔水平,其中15号适配体的亲和力最强,特异性检测表明筛选得到的适配体几乎只与HIV gp41抗原结合,不与其他非特异性蛋白结合.结论 利用随机单链寡核苷酸文库成功获得与HIV gp41抗原特异性结合的适配体,所获得的适配体具有拮抗HIV gp41抗原的能力.
关键词：HIV gp41抗原消减SELEX技术DNA适配体识别
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 1592-1598 )
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