小鼠DNAJB13与HK1的相互作用
杨梦月1
熊紫薇2
李维娜1
贾苗苗1
刘刚1
1.中南大学生殖与干细胞工程研究所,湖南长沙,4100782.益阳市中心医院,湖南益阳,413000
摘要:目的 探讨小鼠DNAJB13与HK1是否具有相互作用.方法 应用双酶切连接方法构建pG EX-4T-1/Dnajb13原核表达载体,测序验证;重组质粒转化感受态细胞DH5α,用IPTG诱导融合蛋白GST-DNAJB13表达,采用SDS-PAGE考马斯亮蓝染色和Western blotting分析蛋白和鉴定;提取小鼠睾丸蛋白,采用GST pull down检测DNAJB13与HK1是否具有相互作用.结果 成功构建pGEX-4T-1-Dnajb13重组质粒,测序结果与标准序列一致;转化重组质粒的大肠杆菌在37℃,IPTG浓度1mmol/L诱导下高效表达融合蛋白;GST pull down检测结果阳性,显示DNAJB13与HK1存在相互作用.结论 在小鼠睾丸中,DNAJB13与HK1存在相互作用,可能参与精子形成和精子运动.
关键词:DNAJB13重组质粒融合蛋白HK1GST pull down精子发生精子运动
资助基金:湖南省自然科学基金(13JJ2007)
论文发表日期:2016-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 1684-1688 )
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