敲低SORL1表达构建模拟阿尔茨海默病的细胞模型
罗静
赵艳
谢婧雯
刘鑫
林芳波
侯德仁
1.中南大学湘雅三医院神经内科,湖南 长沙,4100132.中南大学湘雅三医院神经内科,湖南 长沙,4100133.中南大学湘雅三医院神经内科,湖南 长沙,4100134.中南大学湘雅三医院神经内科,湖南 长沙,4100135.中南大学湘雅三医院神经内科,湖南 长沙,4100136.中南大学湘雅三医院神经内科,湖南 长沙,410013
摘要：目的 通过比较分拣蛋白相关受体1(SORL1)敲低细胞模型和传统的阿尔茨海默病(AD)细胞模型在细胞活力、细胞凋亡率、TNF-α和IL-1β表达的变化,构建一种模拟AD的细胞模型.方法 (1)传统的AD细胞模型的构建:用Aβ25-35诱导N2a细胞并通过检测细胞活力确定最佳的AD细胞模型.(2)SORL1敲低细胞模型的构建:RNA干扰慢病毒载体及空病毒载体分别转染给N2a细胞,采用qRT—PCR和Western blot检测和鉴定细胞内SORL1转染的成功.(3)实验分组:对照组:未经干预的野生型N2a细胞;AD组:用Aβ25-35诱导的N2a细胞;空白组:用慢病毒空载体转染的N2a细胞;SORL1敲低组:SORL1-shRNA慢病毒载体转染的N2a细胞.(4)MTT测定细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,ELISA检测细胞培养上清液中TNF-α、IL-1β的含量.结果 (1)AD组与对照组比较、SORL1敲低组与空白组比较、AD组和SORL1敲低组的细胞活力均降低、细胞凋亡率均增加,差异有统计学意义(P<0.05);AD组与SORL1敲低组比较、对照组与空白组比较,细胞活力和细胞凋亡率均无差异(P>0.05).(2)AD组与对照组比较、SORL1敲低组与空白组比较,AD组和SORL1敲低组的TNF-α和IL-1β含量均增加,差异有统计学意义(P<0.05);AD组与SORL1敲低组比较、对照组与空白组比较,TNF-α和IL-1β含量均无差异(P>0.05).结论 敲低N2a细胞SORL1的表达可能构建一种类似于Aβ诱导的AD细胞模型.
关键词：分拣蛋白相关受体1阿尔茨海默病N2a细胞转染
资助基金：湖南省科技厅重点项目(2016JC2052)新湘雅人才工程至善领跑计划(20150305)中南大学研究生自主探索项目(2017zzts888)
论文发表日期：2018-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 8-13 )
英文信息