人RhoA发生了SUMO化修饰
万滢聪
李春燕
佘佳瑶
王靖雅
陈明
1.南方医科大学神经生物学教研室,广东 广州,5105152.南方医科大学神经生物学教研室,广东 广州,5105153.南方医科大学神经生物学教研室,广东 广州,5105154.南方医科大学神经生物学教研室,广东 广州,5105155.南方医科大学神经生物学教研室,广东 广州,510515
摘要：目的 探讨人RhoA是否发生SUMO化修饰.方法 运用重叠延伸PCR和双酶切连接方法构建pcDNA3-3flag-RhoA真核表达载体,测序验证.将重组RhoA质粒转染进HEK293T细胞中,免疫印迹检测质粒的表达.将重组RhoA质粒分别和SUMO各型质粒共转染进HEK293T细胞中,细胞免疫荧光检测RhoA与SUMO之间是否存在共定位.免疫共沉淀方法检测RhoA是否发生SUMO化修饰.结果 成功构建pcDNA3-3flag-RhoA重组质粒,测序结果提示存在一个同义突变,其余完全正确;免疫印迹检测重组RhoA质粒能高效表达融合蛋白;免疫细胞化学检测到RhoA与SUMO2/3存在共定位,RhoA与SUMO1不存在共定位;免疫共沉淀检测SUMO2/3对RhoA发生修饰作用,SUMO1对RhoA未发生修饰作用.结论 人RhoA发生了SUMO2/3参与的SUMO化修饰,可能参与神经系统损伤后轴突再生的调控.
关键词：RhoASUMO化修饰
资助基金：国家自然科学基金(31371146)国家自然科学基金(81070983)Supported by National Natural Science Foundation of China (31371146)Supported by National Natural Science Foundation of China ( 81070983)
论文发表日期：2018-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 75-80 )
英文信息