MircoRNA-218下调BMI-1表达水平介导的抗骨肉瘤作用
赖桂华1
黄爱兰2
赵志3
卢兴浩1
祖文轩1
1.蚌埠医学院人体解剖学教研室,安徽 蚌埠,2330302.蚌埠医学院化学教研室,安徽 蚌埠,2330303.蚌埠医学院第一附属医院骨科,安徽 蚌埠,233030
摘要：目的 初步探讨microRNA-218在人骨肉瘤中的抗肿瘤作用及其分子机制.方法 利用qRT-PCR检测68例人骨肉瘤组织和癌旁组织中miR-218的表达水平.将miR-218模拟物或抗miR-218模拟物转染入人骨肉瘤Saos-2细胞,通过CCK-8、Annexin V-FITC和Western blotting检测转染后的细胞活性、细胞凋亡和C-PARP蛋白表达水平.利用luciferase assay筛选和识别miR-218的作用靶点及具体作用位点,进一步通过qRT-PCR和Western blotting检测转染miR-218模拟物或抗miR-218模拟物后Saos-2细胞中BMI-1基因和蛋白的表达水平.结果 人骨肉瘤组织中的miR-218表达水平明显低于癌旁组织.CCK-8结果显示,与对照组相比,转染miR-218模拟物24、36和48 h后的Saos-2细胞活性显著降低,而转染抗miR-218模拟物的Saos-2细胞活性则显著增高.同时,转染miR-218模拟物组的C-PARP的蛋白表达水平较转染抗miR-218模拟物组和对照组明显增强.Annexin V-FITC凋亡检测结果显示,转染miR-218模拟物组的细胞凋亡数和凋亡率较对照组显著增加.此外,luciferase assay结果显示Saos-2细胞中miR-218的特异性作用靶点为BMI-1,在miR-218过表达时BMI-1的基因和蛋白表达水平明显被抑制,而miR-218敲除时则显著增强;miR-218可通过直接结合BMI-13'-UTR抑制BMI-1的表达.结论 miR-218可能通过下调BMI-1水平促进人骨肉瘤细胞Saos-2细胞凋亡,进而发挥其抗肿瘤作用.
关键词：miR-218BMI-1骨肉瘤凋亡
论文发表日期：2018-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 505-510 )
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