miR-144-3p在大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化过程中的表达及其靶向调控作用
陆进1
张浩轩2
俞鹏2
龚义凤3
龚喜旺3
范强强4
杨月5
1.组织移植安徽省重点实验室,安徽 蚌埠,2330002.蚌埠医学院人体解剖学教研室,安徽 蚌埠,2330303.芜湖市繁昌县中医医院妇产科,安徽 芜湖,2412004.中国科学院上海生命科学研究院,上海,2002335.蚌埠医学院第一附属医院妇产科,安徽 蚌埠,233000
摘要：目的 探讨在骨髓间充质干细胞成骨分化过程中,miR-144-3p表达的生理功能和作用机制,并预测其靶基因,为成骨细胞分化的深入研究提供实验依据.方法 采用大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),并在体外诱导间充质干细的成骨分化,通过qRT-PCR检测成骨分化标志基因(Runx2,OCN)以及miR-144-3p的表达;通过向BMSCs株转染miR-144-3p mimic以及miR-144-3p inhibitor,检测miR-144-3p表达对BMSCs分化的影响,并通过Western blot以及qRT-PCR检测miR-144-3p靶蛋白在RNA水平以及蛋白水平的表达变化.结果 在体外诱导BMSCs成骨分化过程中,成骨分化标志基因(Runx2,OCN)的表达量逐渐升髙,而miR-144-3p的表达量则逐渐降低,到诱导成骨第21天表达水平最低;检测各组ALP活性发现,相比于对照组miR-144-3p mimics转染组ALP活性显著降低(P<0.05),miR-144-3p inhibitor转染组ALP活性显著升高(P<0.05);运用多种靶基因预测数据库TargetScan、microRNA.org和miRanda对miR-144-3p进行靶基因的预测分析发现,smad4最可能是miR-144-3p的靶基因;qRT-PCR结果表明,smad4在各组中的表达水平差异无统计学意义(P>0.05);Western blot结果显示,smad4在miR-144-3p mimics转染组表达显著下降,在miR-144-3p inhibitor转染组则显著升高,相比于对照组差异均有统计学意义(P<0.05).结论 miR-144-3p参与调控大鼠BMSCs成骨分化,其抑制成骨分化的功能是通过降低smad4转录后的表达水平来实现.
关键词：骨髓间充质干细胞成骨分化miR-144-3p
资助基金：安徽省教育厅高校自然科学重点研究项目(KJ2018A0236)国家自然科学基金(BYKY1758)
论文发表日期：2018-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 1083-1088 )
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