miR-199a-3p靶向Smad1促进小鼠心肌纤维化相关基因的表达
梁景南1
朱文思2
张灼3
朱杰宁3
符永恒3
林秋雄3
邝素娟3
张梦珍3
单志新4
1.南方医科大学药学院,广东 广州,5105152.广东省妇幼保健院药学部,广东 广州,5114003.广东省心血管病研究所,广东省人民医院//广东省医学科学院医学研究中心,广东 广州 5100804.南方医科大学药学院,广东 广州 510515;广东省心血管病研究所,广东省人民医院//广东省医学科学院医学研究中心,广东 广州 510080
摘要：目的 探讨微小RNA-199a-3p(miR-199a-3p)对心肌纤维化的调控作用及其作用靶基因.方法 原代分离并体外培养成体C57BL/6小鼠心肌成纤维细胞;脂质体转染法将miR-199a-3p模拟物和Smad1 siRNA瞬时转染至小鼠心肌成纤维细胞;双荧光素酶报告基因实验检测miR-199a-3p与潜在靶基因Smad13'端非翻译区(3'-UTR)的结合作用;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot法分别检测小鼠心肌成纤维细胞转染miR-199a-3p后,Smad1及纤维化相关基因表达.Western blot检测转染miR-199a-3p,Smad1 siRNA后,小鼠心肌成纤维细胞中纤维化相关基因、Smad1和Smad3的激活水平.结果 RT-qPCR和Western blot结果证实在心肌成纤维细胞中过表达miR-199a-3p可以增强纤维化相关基因表达.双荧光素酶报告基因实验显示miR-199a-3p与Smad13'-UTR有结合作用.RT-qPCR和Western blot结果证实miR-199a-3p可在转录水平抑制Smad1表达.过表达miR-199a-3p和沉默Smad1均能一致性的通过激活Smad3通路而促进心肌成纤维细胞中纤维化相关基因表达.结论miR-199a-3p通过靶向Smad1,从而激活Smad3通路来促进纤维化相关基因表达.
关键词：心肌纤维化心肌成纤维细胞微小RNASmad1
资助基金：国家自然科学基金(91649109)国家自然科学基金(81770264)国家自然科学基金(81470439)广州市科技计划(201804010045)
论文发表日期：2018-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 1203-1208 )
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