人脂肪肝脱细胞支架的制备及肝癌细胞的体外三维培养
郑幸龙1
刘雯雁2
刘锋锋3
李静3
向俊西2
刘鹏2
吕毅2
1.西安交通大学第一附属医院 心血管外科,陕西 西安710061;西安交通大学第一附属医院精准外科与再生医学国家地方联合工程研究中心,陕西 西安7100612.西安交通大学第一附属医院精准外科与再生医学国家地方联合工程研究中心,陕西 西安,7100613.西安交通大学第一附属医院 心血管外科,陕西 西安,710061
摘要:目的 体外建立一个基于人脂肪肝脱细胞支架的肝癌三维模型.方法 通过反复冻融、梯度浓度的SDS和1%Triton X-100经门静脉和肝动脉双重灌注及组织块在Triton X-100中反复震荡的方法制备人脂肪肝脱细胞基质(hFLM).在hFLM内培养HepG2细胞,检测其存活、形态、增殖及黏附分子表达情况.结果 采用双重灌注的方式显著缩短了支架制备的时间,同时保留了肝脏的细胞外基质成分及三维结构.HepG2细胞在hFLM内培养15 d,存活良好,并呈现与体内相似的肿瘤增殖模式.而且,hFLM培养的HepG2细胞和皮下成瘤组均低表达E-cadherin,高表达Vimentin,与二维培养组正好相反.基于hFLM的肝癌模型缺少有效的血管网络,缺乏足够的营养转运,可能导致后期细胞增殖减缓.hFLM培养的HepG2细胞第12天时PCNA指数较第6天时降低了29.3%.结论 建立一种新的人脂肪肝脱细胞方案,并验证了基于hFLM体外构建肝癌模型的可行性.
关键词:人脂肪肝脱细胞支架三维培养肝癌模型
资助基金:国家自然科学基金(81800581)西安交通大学第一附属医院院基金(2017QN-18)中央高校基本科研业务费专项(xjj2018276)
论文发表日期:2019-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:7( 930-936 )
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