下调miR-205-5p增强3-溴丙酮酸对人鼻咽癌CNE2Z细胞的凋亡诱导作用
时宗芬
张配
鲁星月
朱晨露
陈长江
赵素容
刘浩
1.蚌埠医学院药学院//安徽省生化药物工程技术研究中心,安徽 蚌埠,2330302.蚌埠医学院药学院//安徽省生化药物工程技术研究中心,安徽 蚌埠,2330303.蚌埠医学院药学院//安徽省生化药物工程技术研究中心,安徽 蚌埠,2330304.蚌埠医学院药学院//安徽省生化药物工程技术研究中心,安徽 蚌埠,2330305.蚌埠医学院药学院//安徽省生化药物工程技术研究中心,安徽 蚌埠,2330306.蚌埠医学院药学院//安徽省生化药物工程技术研究中心,安徽 蚌埠,2330307.蚌埠医学院药学院//安徽省生化药物工程技术研究中心,安徽 蚌埠,233030
摘要：目的 探讨下调miR-205-5p对3-溴丙酮酸诱导的鼻咽癌CNE2Z细胞凋亡的影响.方法 以鼻咽癌CNE2Z细胞株为研究对象,实验分为4组,分别为对照组、转染组(转染miR-205-5p-mimic或miR-205-5p-inhibitor)、3-溴丙酮酸组(80μmol/L 3-溴丙酮酸)、合用组(转染miR-205-5p-mimic或miR-205-5p-inhibitor后合用3-溴丙酮酸).MTT法检测3-溴丙酮酸和miR-205-5p对CNE2Z细胞增殖的影响;线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)检测细胞早期凋亡情况;DAPI荧光染色法检测细胞核形态变化以及细胞晚期凋亡情况;AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率的变化;Western blot检测Bcl-2、Bax、Mcl-1、Bak蛋白的表达.结果 3-溴丙酮酸对CNE2Z细胞的增殖有明显的抑制作用,并且随着药物浓度和作用时间的增加细胞增殖抑制作用越明显;80μmol/L 3-溴丙酮酸处理CNE2Z细胞24、48、72 h的抑制率分别为(45.7±1.21)％、(64.4±2.02)％、(78.3±1.55)％;转染miR-205-5p-mimic后,80μmol/L 3-溴丙酮酸作用24、48、72 h的抑制率分别为(27.7±1.04)％、(34.8±2.10)％、(44.3±1.57)％;转染miR-205-5p-inhibitor后,80μmol/L 3-溴丙酮酸作用24、48、72 h的抑制率分别为(80.5±0.94)％、(87.9±0.50)％、(93.8±1.16)％.线粒体膜电位检测结果显示,转染miR-205-5p-inhibitor后3-溴丙酮酸组红绿荧光的相对比例明显降低;DAPI荧光检测结果显示,转染miR-205-5p-inhibitor后3-溴丙酮酸组的细胞核碎裂及核固缩明显增加;AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测结果显示,转染miR-205-5p-inhibitor后3-溴丙酮酸组的凋亡率明显高于单独处理组的凋亡率(P<0.01);Western blot检测结果显示,转染miR-205-5p-inhibitor后3-溴丙酮酸组的Bcl-2、Mcl-1蛋白的表达水平明显降低,Bax、Bak蛋白的表达水平明显增高.结论 3-溴丙酮酸能诱导CNE2Z细胞凋亡,转染miR-205-5p-inhibitor能增强3-溴丙酮酸诱导的细胞凋亡,其机制可能与下调Mcl-1和Bcl-2表达,上调Bak和Bax蛋白的表达有关.
关键词：鼻咽癌miR-205-5p3-溴丙酮酸细胞凋亡
资助基金：国家自然科学基金(81603155)安徽省自然科学基金青年项目(1708085QH212)安徽省高等学校自然科学研究重点项目(KJ2016A486)安徽省大学生创新创业训练计划(201710367061)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 1166-1172 )
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