黑根霉胞外多糖硫酸酯的制备及其抗肿瘤活性
秦国正1
邵太丽1
李萍1
周玉燕1
李艳2
洪旭晨2
李璋2
王国栋1
1.皖南医学院药学院;安徽省多糖药物工程技术研究中心;活性生物大分子研究安徽省重点实验室,安徽 芜湖 2410022.皖南医学院药学院
摘要：目的 分析EPS硫酸酯化修饰中配料比对硫酸基取代度的影响及其硫酸酯化修饰对EPS抗肿瘤活性的影响.方法 采用氯磺酸-吡啶法修饰EPS,氯化钡-明胶浊度法测定硫酸基取代度,分析酯化剂配料比对硫酸基取代度的影响;红外光谱分析硫酸基团是否与EPS结合形成硫酸酯;CCK-8法检测EPS硫酸酯(SEPS)抑制人结肠癌HCT 116增殖活性;Annexin V-FITC/PI双染法检测SEPS诱导HCT 116细胞凋亡活性.结果 酯化剂和EPS配料比1:1和2:1条件下产物硫酸基取代度分别为0.98％(SEPS-1)和1.18％(SEPS-2),增加酯化剂配料比可以提高产物取代度(P<0.05).红外光谱分析发现1249 cm-1附近出现-OSO3-的S=O伸缩振动吸收峰,表明硫酸基团与EPS结合形成硫酸酯.CCK-8实验表明,在0.02～0.10 mg/L各浓度梯度范围内,SEPS-1对HCT 116细胞增殖的抑制率明显高于EPS(P<0.05);在0.04、0.06、0.10 mg/mL浓度梯度水平时,SEPS-2活性高于EPS(P<0.05);在0.04～0.08 mg/L各浓度梯度水平,SEPS-1活性高于SEPS-2(P<0.05).流式细胞术检测结果显示SEPS-1诱导HCT 116细胞凋亡活性较EPS明显增强,随着SEPS-1浓度的增加,发生早期凋亡的细胞与坏死细胞相应增加,并呈现剂量依赖性,0.06、0.08、0.10 mg/mL处理组细胞早期凋亡率分别为6.38％、11.8％与12.5％,晚期凋亡和坏死细胞率分别为5.26％、8.04％、6.80％.结论 黑根霉EPS硫酸酯化修饰中,酯化剂配料比对产物取代度有直接影响,增加酯化剂配料比可以提高产物取代度.黑根霉EPS硫酸酯化修饰可以提高其抗肿瘤活性,但取代度高低与活性高低没有直接关系.
关键词：黑根霉胞外多糖硫酸酯抗肿瘤活性细胞凋亡
资助基金：安徽省高等学校自然科学研究重点项目(KJ2017A257)安徽省自然科学基金(1908085MH248)活性生物大分子研究安徽省重点实验室自主研究课题(LAB201801)活性生物大分子研究安徽省重点实验室自主研究课题(LAB201804)大学生创新创业训练计划项目(201810368009)大学生创新创业训练计划项目(201810368072)大学生创新创业训练计划项目(201810368074)
论文发表日期：2019-10-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1227-1231 )
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