CircRNA_005647通过结合miR-27b-3p抑制小鼠心肌成纤维细胞中纤维化相关基因表达
袁淑菁1
梁景南2
张铭3
朱杰宁3
潘蓉4
李晖3
曾妮1
温艺红1
易芷瑶4
单志新5
1.华南理工大学医学院,广东 广州,5100062.江门市中心医院药学部,广东 江门,5290303.广东省心血管病研究所//广东省人民医院(广东省医学科学院)医学研究中心,广东 广州,5100804.华南理工大学生物科学与工程学院,广东 广州,5100065.华南理工大学医学院,广东 广州 510006;广东省心血管病研究所//广东省人民医院(广东省医学科学院)医学研究中心,广东 广州 510080
摘要：目的 研究环形RNA circRNA_005647对小鼠心肌成纤维细胞(CFs)纤维化表型的影响及分子机制.方法 利用血管紧张素Ⅱ缓释泵[1.46 mg/(kg·d),2周]诱导建立小鼠高血压心肌纤维化模型,采用Masson染色观察心肌纤维化程度.实时荧光定量PCR检测发生纤维化的小鼠心肌及血管紧张素Ⅱ诱导的小鼠CFs中circRNA_005647的表达.利用放线菌素D和RNase R实验检测circRNA_005647的稳定性.利用重组circRNA_005647腺病毒(rAd-circRNA_005647)感染小鼠CFs,检测CFs中纤维化相关基因Col1a1、Col3a1、Acta2的mRNA和蛋白表达变化.双荧光素酶报告基因实验、RNA反义纯化实验及RNA Pull-down实验验证circRNA_005647与微小RNA miR-27b-3p的结合作用.结果 RT-qPCR结果显示,circRNA_005647在高血压诱导纤维化的小鼠心肌和Ang-II处理的小鼠CFs中表达增强(P<0.01).放线菌素D和RNase R实验证实circRNA_005647比其宿主基因Myo9a mRNA具有更好的稳定性(P<0.01)和抵抗RNase R的降解作用.过表达circRNA_005647可显著抑制小鼠CFs中纤维化相关基因Col1a1、Col3a1和Acta2表达(P<0.05).双荧光素酶报告基因实验、RNA反义纯化实验及RNA Pull down实验一致性地证实了circRNA_005647与miR-27b-3p之间存在特异结合作用,miR-27b-3p具有促进小鼠CFs的纤维化表型作用(P<0.05),并可减弱circRNA_005647对小鼠CFs中纤维化相关基因表达的抑制作用.结论 CircRNA_005647在心肌纤维化中表达增强,并通过结合miR-27b-3p发挥抑制心肌纤维化作用.
关键词：环形RNAcircRNA_005647miR-27b-3p心肌纤维化心肌成纤维细胞
资助基金：国家自然科学基金(91649109)国家自然科学基金(81770264)广州市科技计划(201804010045)
论文发表日期：2019-11-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 1312-1319 )
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