外泌体双膜蛋白共表达检测平台:基于磁性分离和催化发夹组装
陈贤华1
潘炜伦2
李博2
郑磊2
1.南方医科大学南方医院检验科,广东 广州 510515;广西医科大学附属柳铁中心医院检验科,广西 柳州5450072.南方医科大学南方医院检验科,广东 广州,510515
摘要：目的 构建基于磁性分离和催化发夹组装(CHA)信号放大策略的外泌体双膜蛋白共表达检测平台.方法 细胞培养与细胞上清液中外泌体的分离纯化和表征.超分辨成像技术与免疫印迹实验表征CD63在外泌体膜上的表达.外泌体与AptEpCAM-T催发链反应电泳图验证EpCAM适配体与外泌体结合.荧光检测法验证CHA核酸序列的可行性、优化反应条件以及验证该方法特异性.结果 超分辨成像技术与免疫印迹实验显示乳腺癌MDA-MB-231细胞来源外泌体富含CD63膜蛋白.外泌体与AptEpCAM-T催发链反应电泳结果显示EpCAM适配体能够识别并结合外泌体.检测平台特异性试验:人正常乳腺上皮细胞外泌体(MCF-10a exo)荧光检测信噪比:1.10±0.01,乳腺癌细胞外泌体(MDA-MB-231 exo)荧光检测信噪比:2.09±0.08.结论 构建基于磁性分离和CHA信号放大策略的外泌体双膜蛋白共表达检测平台.可同时检测外泌体膜上表达的两种蛋白:CD63和EpCAM.乳腺癌细胞外泌体与人正常乳腺上皮细胞外泌体膜蛋白CD63和蛋白EpCAM表达有区分度.
关键词：外泌体膜蛋白磁性分离催化发夹组装
资助基金：国家自然科学基金(81702100)广州市健康医疗协同创新重大专项(201604020015)广州市健康医疗协同创新重大专项(201704020213)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 1453-1460 )
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