miR-449a/b负反馈调节E2F1抑制胃癌细胞增殖
林爱琴1
卜文婕1
汪萍1
高继光1
杨建课1
丁飞雨2
李铁臣1
1.皖南医学院 医学生物学教研室,,安徽 芜湖 2410022.皖南医学院 临床医学院,安徽 芜湖 241002
摘要：目的 探讨miR-449a/b在胃癌发生中的可能作用机制.方法 采用qRT-PCR方法检测了miR-449a/b和E2F1基因在胃癌细胞BGC-823和胃粘膜细胞GES-1表达情况;采用瞬时转染技术将miR-449a/b模拟物(mimic)以及mimic阴性对照分别转入胃癌细胞BGC-823中,qRT-PCR验证转染成功后,通过CCK-8法检测胃癌细胞的增殖能力,流式细胞术检测胃癌细胞凋亡的变化,细胞划痕实验检测胃癌细胞的迁移能力,Western blot方法检测miR-449a/b上调后其靶基因蛋白的表达水平;并通过转染E2F1过表达质粒和空质粒对照入胃癌细胞BGC-823,Western blot确定转染效率后,分别用qRT-PCR和数字PCR检测miR-449a/b的表达水平.结果 相比于正常胃粘膜细胞株GES-1,miR-449a/b在胃癌细胞株BGC-823中表达均下调(P<0.01);过表达miR-449a/b可抑制胃癌细胞BGC-823增殖和迁移,并促进其凋亡(P<0.05);过表达的E2F1可上调miR-449a/b的表达(P<0.001),而上调miR-449a/b的表达,其直接靶基因CDK4、CDK6表达下调,并可通过CDKs-pRb-E2F1信号通路,间接下调E2F1蛋白的表达(P<0.01).结论 miR-449a/b的低表达和E2F1的高表达均参与了胃癌的发生、发展,并且miR-449a/b能负反馈调节E2F1抑制胃癌细胞增殖.
关键词：胃癌miR-449a/bE2F1细胞增殖
资助基金：安徽省高等学校自然科学研究重点项目(KJ2017A252)安徽省高等学校自然科学研究重点项目(KJ2019A0426)安徽省重点实验室自主研究课题(LAB201605)皖南医学院中青年课题(WK201904)
论文发表日期：2020-01-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 13-19 )
英文信息